Den kinesiske farmakopéen (2020-utgaven) krever at metanolekstraktet av YCH ikke skal være mindre enn 20,0 % [2], uten andre kvalitetsevalueringsindikatorer spesifisert. Resultatene av denne studien viser at innholdet i metanolekstraktene fra de ville og kultiverte prøvene begge oppfylte farmakopéstandarden, og det var ingen signifikant forskjell mellom dem. Derfor var det ingen tilsynelatende kvalitetsforskjell mellom ville og kultiverte prøver, ifølge den indeksen. Imidlertid var innholdet av totale steroler og totale flavonoider i de ville prøvene betydelig høyere enn i de dyrkede prøvene. Ytterligere metabolomisk analyse avslørte rikelig metabolittdiversitet mellom de ville og kultiverte prøvene. I tillegg ble 97 signifikant forskjellige metabolitter screenet ut, som er oppført iTilleggstabell S2. Blant disse signifikant forskjellige metabolittene er β-sitosterol (ID er M397T42) og quercetinderivater (M447T204_2), som er rapportert å være aktive ingredienser. Tidligere urapporterte bestanddeler, slik som trigonellin (M138T291_2), betain (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenon (M241T189), arctiin (M557T165) og logansyre (M4_29T28 inkludert blant de forskjellige metabolittene). Disse komponentene spiller forskjellige roller i antioksidasjon, anti-inflammatorisk, fjernende frie radikaler, anti-kreft og behandling av aterosklerose og kan derfor utgjøre antatt nye aktive komponenter i YCH. Innholdet av aktive ingredienser bestemmer effektiviteten og kvaliteten til de medisinske materialene [7]. Oppsummert har metanolekstrakt som den eneste YCH kvalitetsevalueringsindeksen noen begrensninger, og mer spesifikke kvalitetsmarkører må utforskes videre. Det var signifikante forskjeller i totalt antall steroler, totalt antall flavonoider og innholdet av mange andre differensielle metabolitter mellom den ville og kultiverte YCH; så det var potensielt noen kvalitetsforskjeller mellom dem. Samtidig kan de nylig oppdagede potensielle aktive ingrediensene i YCH ha en viktig referanseverdi for studiet av det funksjonelle grunnlaget til YCH og videreutviklingen av YCH-ressurser.
Betydningen av ekte medisinske materialer har lenge vært anerkjent i den spesifikke opprinnelsesregionen for å produsere kinesiske urtemedisiner av utmerket kvalitet [
8]. Høy kvalitet er en vesentlig egenskap ved ekte medisinske materialer, og habitat er en viktig faktor som påvirker kvaliteten på slike materialer. Helt siden YCH begynte å bli brukt som medisin, har den lenge vært dominert av vill YCH. Etter den vellykkede introduksjonen og domestiseringen av YCH i Ningxia på 1980-tallet, skiftet kilden til Yinchaihu medisinske materialer gradvis fra vill til kultivert YCH. I følge en tidligere undersøkelse av YCH-kilder [
9] og feltundersøkelsen til vår forskningsgruppe, er det betydelige forskjeller i distribusjonsområdene til de dyrkede og ville medisinske materialene. Den ville YCH er hovedsakelig distribuert i den autonome regionen Ningxia Hui i Shaanxi-provinsen, ved siden av den tørre sonen i Indre Mongolia og sentrale Ningxia. Spesielt er ørkensteppen i disse områdene det mest egnede habitatet for YCH-vekst. I motsetning er den dyrkede YCH hovedsakelig distribuert sør for det ville distribusjonsområdet, slik som Tongxin County (Cultivated I) og områdene rundt, som har blitt den største dyrkings- og produksjonsbasen i Kina, og Pengyang County (Cultivated II) , som ligger i et mer sørlig område og er et annet produksjonsområde for dyrket YCH. Dessuten er habitatene til de to ovennevnte dyrkede områdene ikke ørkensteppe. Derfor, i tillegg til produksjonsmåten, er det også betydelige forskjeller i habitatet til den ville og kultiverte YCH. Habitat er en viktig faktor som påvirker kvaliteten på urtemedisinske materialer. Ulike habitater vil påvirke dannelsen og akkumuleringen av sekundære metabolitter i plantene, og dermed påvirke kvaliteten på legemidler [
10,
11]. Derfor kan de signifikante forskjellene i innholdet av totale flavonoider og totale steroler og uttrykket av de 53 metabolittene som vi fant i denne studien være et resultat av feltforvaltning og habitatforskjeller.
En av de viktigste måtene miljøet påvirker kvaliteten på medisinske materialer på er ved å utøve stress på kildeplantene. Moderat miljøstress har en tendens til å stimulere akkumulering av sekundære metabolitter [
12,
13]. Vekst/differensieringsbalansehypotesen sier at når næringsstoffer er i tilstrekkelig tilførsel, vokser først og fremst planter, mens når næringsstoffer mangler, differensierer plantene hovedsakelig og produserer flere sekundære metabolitter [
14]. Tørkestress forårsaket av vannmangel er det viktigste miljøstresset som planter står overfor i tørre områder. I denne studien er vanntilstanden til den kultiverte YCH mer rikelig, med årlige nedbørsnivåer betydelig høyere enn for den ville YCH (vanntilførselen for Cultivated I var omtrent 2 ganger den for Wild; Cultivated II var omtrent 3,5 ganger den for Wild. ). I tillegg er jorda i det ville miljøet sandjord, men jorda i jordbruksjorda er leirjord. Sammenlignet med leire har sandjord dårlig vannretensjonsevne og er mer sannsynlig å forverre tørkestress. Samtidig ble dyrkingsprosessen ofte ledsaget av vanning, så graden av tørkestress var lav. Vill YCH vokser i tøffe naturlige tørre habitater, og derfor kan den lide av mer alvorlig tørkestress.
Osmoregulering er en viktig fysiologisk mekanisme der planter takler tørkestress, og alkaloider er viktige osmotiske regulatorer i høyere planter [
15]. Betainer er vannløselige alkaloide kvaternære ammoniumforbindelser og kan fungere som osmobeskyttende midler. Tørkestress kan redusere det osmotiske potensialet til celler, mens osmobeskyttende midler bevarer og opprettholder strukturen og integriteten til biologiske makromolekyler, og effektivt lindre skaden forårsaket av tørkestress på planter [
16]. For eksempel, under tørkestress, økte betaininnholdet i sukkerroer og Lycium barbarum betydelig [
17,
18]. Trigonelline er en regulator av cellevekst, og under tørkestress kan det forlenge lengden på plantecellesyklusen, hemme cellevekst og føre til krymping av cellevolum. Den relative økningen i konsentrasjonen av oppløste stoffer i cellen gjør planten i stand til å oppnå osmotisk regulering og forbedre dens evne til å motstå tørkestress [
19]. JIA X [
20] fant at, med en økning i tørkestress, produserte Astragalus membranaceus (en kilde til tradisjonell kinesisk medisin) mer trigonelline, som virker for å regulere osmotisk potensial og forbedre evnen til å motstå tørkestress. Flavonoider har også vist seg å spille en viktig rolle i planteresistens mot tørkestress [
21,
22]. Et stort antall studier har bekreftet at moderat tørkestress bidro til akkumulering av flavonoider. Lang Duo-Yong et al. [
23] sammenlignet effekten av tørkestress på YCH ved å kontrollere vannholdingskapasiteten i feltet. Det ble funnet at tørkestress hemmet veksten av røtter til en viss grad, men ved moderat og alvorlig tørkestress (40 % vannholdeevne i felten) økte det totale flavonoidinnholdet i YCH. I mellomtiden, under tørkestress, kan fytosteroler fungere for å regulere cellemembranens fluiditet og permeabilitet, hemme vanntap og forbedre stressmotstanden [
24,
25]. Derfor kan den økte akkumuleringen av totale flavonoider, totale steroler, betain, trigonellin og andre sekundære metabolitter i vill YCH være relatert til tørkestress med høy intensitet.
I denne studien ble KEGG-baneanrikningsanalyse utført på metabolittene som ble funnet å være signifikant forskjellige mellom den ville og kultiverte YCH. De berikede metabolittene inkluderte de involverte i metabolismen av askorbat og aldarat, aminoacyl-tRNA-biosyntese, histidinmetabolisme og beta-alaninmetabolisme. Disse metabolske veiene er nært knyttet til plantestressresistensmekanismer. Blant dem spiller askorbatmetabolisme en viktig rolle i planteantioksidantproduksjon, karbon- og nitrogenmetabolisme, stressresistens og andre fysiologiske funksjoner.
26]; aminoacyl-tRNA biosyntese er en viktig vei for proteindannelse [
27,
28], som er involvert i syntesen av stressresistente proteiner. Både histidin- og β-alaninveier kan øke plantetoleransen mot miljøstress [
29,
30]. Dette indikerer videre at forskjellene i metabolitter mellom den ville og kultiverte YCH var nært knyttet til prosessene med stressmotstand.
Jord er det materielle grunnlaget for vekst og utvikling av medisinplanter. Nitrogen (N), fosfor (P) og kalium (K) i jord er viktige næringselementer for vekst og utvikling av planter. Jordorganisk materiale inneholder også N, P, K, Zn, Ca, Mg og andre makroelementer og sporelementer som kreves for medisinplanter. For mye eller mangelfull næringsstoffer, eller ubalanserte næringsforhold, vil påvirke veksten og utviklingen og kvaliteten på medisinske materialer, og forskjellige planter har ulike næringsbehov [
31,
32,
33]. For eksempel fremmet et lavt N-stress syntesen av alkaloider i Isatis indigotica, og var gunstig for akkumulering av flavonoider i planter som Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge og Dichondra repens Forst. I motsetning til dette, hemmet for mye N akkumulering av flavonoider i arter som Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis og Ginkgo biloba, og påvirket kvaliteten på medisinske materialer [
34]. Påføring av P-gjødsel var effektiv for å øke innholdet av glycyrrhizinsyre og dihydroaceton i Ural lakris [
35]. Når påføringsmengden oversteg 0·12 kg·m−2, sank det totale flavonoidinnholdet i Tussilago farfara [
36]. Bruken av en P-gjødsel hadde en negativ effekt på innholdet av polysakkarider i den tradisjonelle kinesiske medisinen rhizoma polygonati [
37], men en K-gjødsel var effektiv til å øke innholdet av saponiner [
38]. Å tilføre 450 kg·hm−2 K gjødsel var det beste for vekst og saponinakumulering av to år gamle Panax notoginseng [
39]. Under forholdet N:P:K = 2:2:1 var de totale mengdene hydrotermisk ekstrakt, harpagide og harpagoside de høyeste [
40]. Det høye forholdet mellom N, P og K var gunstig for å fremme veksten av Pogostemon-hytten og øke innholdet av flyktig olje. Et lavt forhold mellom N, P og K økte innholdet av de viktigste effektive komponentene i Pogostemon cablin stammebladolje [
41]. YCH er en karrig jordtolerant plante, og den kan ha spesifikke krav til næringsstoffer som N, P og K. I denne studien, sammenlignet med den dyrkede YCH, var jorden til de ville YCH-plantene relativt karrig: jordinnholdet av organisk materiale, totalt N, totalt P og totalt K var henholdsvis ca. 1/10, 1/2, 1/3 og 1/3 av kulturplantene. Derfor kan forskjellene i jordnæringsstoffer være en annen årsak til forskjellene mellom metabolittene påvist i den dyrkede og ville YCH. Weibao Ma et al. [
42] fant at påføring av en viss mengde N-gjødsel og P-gjødsel forbedret utbyttet og kvaliteten på frøene betydelig. Effekten av næringselementer på kvaliteten til YCH er imidlertid ikke klar, og befruktningstiltak for å forbedre kvaliteten på medisinske materialer trenger ytterligere studier.
Kinesiske urtemedisiner har egenskapene til "Gunstige habitater fremmer utbytte, og ugunstige habitater forbedrer kvaliteten" [
43]. I prosessen med et gradvis skifte fra vill til kultivert YCH, endret habitatet til plantene seg fra den tørre og golde ørkensteppen til fruktbar jordbruksland med mer rikelig vann. Habitatet til den dyrkede YCH er overlegen og utbyttet er høyere, noe som er nyttig for å møte markedsetterspørselen. Imidlertid førte dette overlegne habitatet til betydelige endringer i metabolittene til YCH; hvorvidt dette bidrar til å forbedre kvaliteten på YCH og hvordan man oppnår en høykvalitets produksjon av YCH gjennom vitenskapsbaserte dyrkingstiltak vil kreve ytterligere forskning.
Simulativ habitatdyrking er en metode for å simulere habitat og miljøforhold for ville medisinplanter, basert på kunnskap om plantens langsiktige tilpasning til spesifikke miljøbelastninger [
43]. Ved å simulere ulike miljøfaktorer som påvirker ville planter, spesielt det opprinnelige habitatet til planter brukt som kilder til autentiske medisinske materialer, bruker tilnærmingen vitenskapelig design og innovativ menneskelig intervensjon for å balansere veksten og sekundær metabolisme av kinesiske medisinske planter [
43]. Metodene tar sikte på å oppnå de optimale ordningene for utvikling av medisinske materialer av høy kvalitet. Simulativ habitatdyrking bør gi en effektiv måte for høykvalitetsproduksjon av YCH selv når det farmakodynamiske grunnlaget, kvalitetsmarkørene og responsmekanismene på miljøfaktorer er uklare. Følgelig foreslår vi at vitenskapelig design og feltforvaltningstiltak i dyrking og produksjon av YCH bør utføres med referanse til miljøegenskapene til vill YCH, som tørre, karrige og sandholdige jordforhold. Samtidig er det også håp om at forskere vil forske mer i dybden på det funksjonelle materialgrunnlaget og kvalitetsmarkørene til YCH. Disse studiene kan gi mer effektive evalueringskriterier for YCH, og fremme produksjon av høy kvalitet og bærekraftig utvikling av industrien.