Ren Saposhnikovia divaricata-olje for stearinlys og såpefremstilling engros diffuser eterisk olje ny for sivbrenner diffusorer

kort beskrivelse:

2.1. Utarbeidelse av SDE

Jordstengler av SD ble kjøpt som en tørket urt fra Hanherb Co. (Guri, Korea). Plantematerialene ble bekreftet taksonomisk av Dr. Go-Ya Choi ved Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). Et kupongprøve (nummer 2014 SDE-6) ble deponert i Korean Herbarium of Standard Herbal Resources. Tørkede jordstengler av SD (320 g) ble ekstrahert to ganger med 70 % etanol (med 2 timers tilbakeløp) og ekstraktet ble deretter konsentrert under redusert trykk. Avkoket ble filtrert, lyofilisert og lagret ved 4°C. Utbyttet av tørket ekstrakt fra rå utgangsmaterialer var 48,13 % (vekt/vekt).

2.2. Kvantitativ høyytelses væskekromatografi (HPLC) analyse

Kromatografisk analyse ble utført med et HPLC-system (Waters Co., Milford, MA, USA) og en fotodiode array-detektor. For HPLC-analyse av SDE, prim-O-glucosylcimifugin-standarden ble kjøpt fra Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea), ogsek-O-glukosylhamaudol og 4′-O-β-D-glukosyl-5-O-methylvisamminol ble isolert i vårt laboratorium og identifisert ved spektralanalyser, primært ved NMR og MS.

SDE-prøver (0,1 mg) ble oppløst i 70 % etanol (10 ml). Kromatografisk separasjon ble utført med en XSelect HSS T3 C18 kolonne (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Den mobile fasen besto av acetonitril (A) og 0,1 % eddiksyre i vann (B) med en strømningshastighet på 1,0 ml/min. Et flertrinns gradientprogram ble brukt som følger: 5 % A (0 min), 5–20 % A (0–10 min), 20 % A (10–23 min) og 20–65 % A (23–40 min. ). Deteksjonsbølgelengden ble skannet ved 210–400 nm og registrert ved 254 nm. Injeksjonsvolumet var 10,0μL. Standardløsninger for bestemmelse av tre kromoner ble fremstilt ved en sluttkonsentrasjon på 7,781 mg/ml (prim-O-glukosylcimifugin), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glukosyl-5-O-metylvisaminol), og 31,125 mg/ml (sek-O-glukosylhamaudol) i metanol og holdt ved 4°C.

2.3. Evaluering av antiinflammatorisk aktivitetIn Vitro

2.3.1. Cellekultur og prøvebehandling

RAW 264.7-celler ble hentet fra American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) og dyrket i DMEM-medium inneholdende 1 % antibiotika og 5,5 % FBS. Celler ble inkubert i en fuktet atmosfære av 5% CO2 ved 37°C. For å stimulere cellene ble mediet erstattet med ferskt DMEM-medium og lipopolysakkarid (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) ved 1μg/ml ble tilsatt i nærvær eller fravær av SDE (200 eller 400μg/ml) i ytterligere 24 timer.

2.3.2. Bestemmelse av nitrogenoksid (NO), prostaglandin E2 (PGE2), tumornekrosefaktor-α(TNF-α) og Interleukin-6 (IL-6) produksjon

Celler ble behandlet med SDE og stimulert med LPS i 24 timer. NO-produksjonen ble analysert ved å måle nitritt ved å bruke Griess-reagenset i henhold til en tidligere studie [12]. Utskillelse av de inflammatoriske cytokinene PGE2, TNF-α, og IL-6 ble bestemt ved bruk av et ELISA-sett (FoU-systemer) i henhold til produsentens instruksjoner. Effektene av SDE på NO og cytokinproduksjon ble bestemt ved 540 nm eller 450 nm ved å bruke en Wallac EnVision™mikroplateleser (PerkinElmer).

2.4. Evaluering av antiosteoartrittaktivitetIn Vivo

2.4.1. Dyr

Sprague-Dawley hannrotter (7 uker gamle) ble kjøpt fra Samtako Inc. (Osan, Korea) og holdt under kontrollerte forhold med en 12-timers lys/mørke-syklus kl.°C og% fuktighet. Rotter ble utstyrt med laboratoriefôr og vannad libitum. Alle eksperimentelle prosedyrer ble utført i samsvar med National Institutes of Health (NIH) retningslinjer og godkjent av Animal Care and Use Committee ved Daejeon-universitetet (Daejeon, republikken Korea).

2.4.2. Induksjon av OA med MIA hos rotter

Dyrene ble randomisert og tildelt behandlingsgrupper før starten av studien (per gruppe). MIA-løsning (3 mg/50μL av 0,9% saltvann) ble direkte injisert i det intraartikulære rommet i høyre kne under anestesi indusert med en blanding av ketamin og xylazin. Rotter ble delt tilfeldig inn i fire grupper: (1) saltvannsgruppen uten MIA-injeksjon, (2) MIA-gruppen med MIA-injeksjon, (3) den SDE-behandlede gruppen (200 mg/kg) med MIA-injeksjon, og (4 ) den indometacin-(IM-)-behandlede gruppen (2 mg/kg) med MIA-injeksjon. Rotter ble administrert oralt med SDE og IM 1 uke før MIA-injeksjon i 4 uker. Doseringen av SDE og IM brukt i denne studien var basert på de som ble brukt i tidligere studier [10,13,14].

2.4.3. Målinger av bakpotevektbærende fordeling

Etter OA-induksjon ble den opprinnelige balansen i vektbærende evne til bakpoter forstyrret. En incapacitance tester (Linton instrumentation, Norfolk, UK) ble brukt for å evaluere endringer i vektbæringstoleransen. Rotter ble forsiktig plassert i målekammeret. Den vektbærende kraften som ble utøvd av bakbenet ble beregnet i gjennomsnitt over en 3 s periode. Vektfordelingsforholdet ble beregnet ved hjelp av følgende ligning: [vekt på høyre bakben/(vekt på høyre bakben + vekt på venstre bakben)] × 100 [15].

2.4.4. Målinger av serumcytokinnivåer

Blodprøvene ble sentrifugert ved 1500 g i 10 minutter ved 4°C; deretter ble serumet samlet og lagret ved -70°C frem til bruk. Nivåene av IL-1β, IL-6, TNF-α, og PGE2 i serumet ble målt ved bruk av ELISA-sett fra R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) i henhold til produsentens instruksjoner.

2.4.5. Kvantitativ RT-PCR-analyse i sanntid

Totalt RNA ble ekstrahert fra kneleddsvev ved bruk av TRI-reagens® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), revers-transkribert til cDNA og PCR-amplifisert ved bruk av et TM One Step RT PCR-sett med SYBR-grønt (Applied Biosystems) , Grand Island, NY, USA). Kvantitativ PCR i sanntid ble utført ved å bruke Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-systemet (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Primersekvensene og probesekvensen er vist i tabell1. Alikvoter av prøve-cDNA-er og en lik mengde GAPDH-cDNA ble amplifisert med TaqMan® Universal PCR-masterblandingen inneholdende DNA-polymerase i henhold til produsentens instruksjoner (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR-forholdene var 2 minutter ved 50 °C, 10 minutter ved 94 °C, 15 sekunder ved 95 °C og 1 minutt ved 60 °C i 40 sykluser. Konsentrasjonen av målgenet ble bestemt ved å bruke den sammenlignende Ct-metoden (terskelsyklusnummer ved krysspunkt mellom amplifikasjonsplott og terskel), i henhold til produsentens instruksjoner.

FOB-pris:USD 0,5–9 999 / stk

Min. bestillingsantall:100 stykker/stykker

Forsyningsevne:10 000 stykker/stykker per måned

Send e-post til oss

Produktdetaljer

Produktetiketter

Artrose (OA) er den hyppigste muskel- og skjelettlidelsen og den vanligste degenerative leddsykdommen hos eldre [1]. OA er en tilstand forårsaket delvis av skade, tap av bruskstruktur og funksjon, og dysregulering av proinflammatoriske og antiinflammatoriske veier [2,3]. Det påvirker først og fremst leddbrusken og subkondrale bein i synovialleddene og resulterer i leddsvikt, noe som fører til smerter ved vektbæring inkludert gange og stående [4].

Det er ingen kur for OA, siden det er svært vanskelig å gjenopprette brusken når den først er ødelagt [5]. Målene med behandlingen er å lindre smerte, opprettholde eller forbedre leddmobilitet, øke leddstyrken og minimere de invalidiserende effektene av sykdommen. Farmakologiske behandlinger av OA har som mål å redusere smerte for å øke pasientens leddfunksjon og livskvalitet. Selv om bruskødeleggelse er hovedhendelsen ved OA, er nedbrytningen av kollagen den grunnleggende hendelsen som bestemmer den irreversible progresjonen av OA i forbindelse med betennelse [6,7]. Behandlinger med antiinflammatorisk og kondrobeskyttende aktivitet forventes å lindre smerte og opprettholde matriseintegritet hos OA-pasienter.

Derfor vil redusert betennelse sannsynligvis være fordelaktig i OA-behandling. Nyere studier tyder på beskyttende roller for urteressurser på progresjon av OA, i form av demping av kondrocyttbetennelse og ytterligere bruskødeleggelse, gjennom deres evne til å samhandle med leddassosiert vev, noe som resulterer i demping av leddsmerter [8].

Roten tilSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) har blitt mye brukt i tradisjonell medisin for behandling av hodepine, smerte, betennelse og leddgikt i Korea og Kina [9,10]. De forskjellige farmakologiske effektene avSaposhnikovia divaricata(SD) inkluderer også antiinflammatoriske, smertestillende, febernedsettende og antiartritiske egenskaper [9,11]. En fersk studie viste at SD-kromonekstrakt har potensielle antirevmatoid artritteffekter i en musemodell av kollagenindusert leddgikt [10]; Imidlertid har få studier blitt utført for å støtte den antiinflammatoriske og antiartrittaktiviteten tilSaposhnikovia divaricataekstrakt (SDE).

Derfor undersøkte denne studien de antiinflammatoriske og antiosteoartrose aktivitetene til et 70 % etanolekstrakt av SD. Først ble den antiinflammatoriske effekten av SDE evaluertin vitroi LPS-induserte RAW 264.7-celler. Deretter ble antiosteoartritteffekten av SDE målt ved å vurdere vektbærende fordeling, nedbrytning av leddbrusk og inflammatoriske responser i en rottemodell av mononatriumjodacetat- (MIA-) indusert OA.